NanoBRET™是大幅改良的生物发光共振能量转移（BRET）分析平台，使用小而明亮的专利型NanoLuc® 萤光素酶作为能量供体和细胞可渗透的NanoBRET™ TE tracer 作为能量受体。添加待测化合物后，化合物与 tracer 竞争靶蛋白的结合而导致BRET信号减弱。
NanoBRET™ TE K192 Kinase Selectivity System 用于广泛激酶选择性分析检测，可以在单次实验中定量检测化合物对192种激酶的占有率。该系统包含：
● NanoBRET™ TE K192 Kinase Vector Panel （192 种激酶载体组试板，Panel A和B两个96孔板）
● NanoBRET™ TE Intracellular Kinase Assay (K-10)（激酶检测系统）
● NanoBRET™ TE CDK Kinase Vector Panel A (8种已经过高度研究的CDK激酶载体组试板) 或Panel B (8种未充分研究的CDK激酶载体组试板)
● NanoBRET™ TE Intracellular Kinase Assay (K-10)（激酶检测系统）
每种载体已经与细胞周期蛋白表达载体或载体DNA预先混合，以实现最佳的转染效果，只需解冻稀释这些载体混合物，将载体组转染到多孔板的HEK293 细胞中。孵育过夜后，将待测化合物添加到检测板中，并进行NanoBRET™ TE Assay K-10，使用NanoBRET™ Tracer ，通过多功能检测仪检测BRET 信号。
CDK激酶抑制剂检测
利用梯度稀释法对载体组A 和 B 中的 16 个 CDK 与一组抑制剂进行了测试。CDK4/6 抑制剂 Palbociclib（图A 和上表） 和 Ribociclib（表） ，显示出对 CDK4/6 非常高的选择性。而 Abemaciclib（图B 和上表） 最然对 CDK4/6 具有选择性，但它也对CDK9 和 TAIRE 家族具有选择性。其他抑制剂能有效参与CDK4/6，但也表现出附带参与其他 CDK 家族，包括 TAIRE 家族。表中没有展示>1μM 的亲和力，尽管它们是被检测的（如图A）
来源于promega官网
