发现治疗肥胖症的潜在新靶点

肥胖已成为世界范围内最严重的公共卫生问题之一。最新数据显示，全球肥胖人口已超过10亿。肥胖的根本原因是能量摄入与能量消耗之间的不平衡，而棕色和米色脂肪组织正成为治疗肥胖症的新靶点，因为它们能通过产热来促进能量消耗。

近期的研究显示，M2型巨噬细胞能促进脂肪组织产热，但具体机制仍存在争议。阻断parvalbumin（小清蛋白）能促进巨噬细胞向M2型极化，并改善饮食诱导的肥胖。

研究人员采用TMT定量蛋白质组学分析来确定研究靶点。之后，他们在骨髓来源的巨噬细胞（BMDM）和小鼠上开展体外和体内分析。parvalbumin基因敲除小鼠购自赛业生物。他们还构建了表达parvalbumin的腺病毒。在后续的机制分析中，他们使用了pull-down、免疫沉淀、免疫印迹、流式细胞术等多种分析技术。

1.parvalbumin作为循环因子被运动所抑制

运动可增加哺乳动物的能量消耗，有助于达到能量平衡。以往的研究发现，运动导致棕色脂肪组织中的M2型巨噬细胞增加以及M1型巨噬细胞减少。于是，研究团队开始寻找诱导巨噬细胞向M2型极化的调控因子。他们以运动和久坐的小鼠作为研究对象，对其血清样本开展无偏的定量蛋白质组学分析。

他们发现，运动导致parvalbumin等多个蛋白显著降低。parvalbumin（PVALB）是EF-hand钙结合蛋白家族中的成员，在小鼠肌肉中高表达。与久坐的小鼠相比，运动小鼠血清内的parvalbumin水平显著下调（图1）。他们还发现，骨髓来源的巨噬细胞经过parvalbumin处理后，M2型标志物的表达被大大抑制，而M1型标志物表达增加。这些结果表明，parvalbumin作为巨噬细胞极化的调控因子，被运动所抑制。

图1 parvalbumin被鉴定为M2型巨噬细胞的调控因子[1]

（图源：Lin S, et al,. Nat Commun. 2022）

为了鉴定循环parvalbumin的功能，研究人员接下来使用了赛业生物提供的雄性parvalbumin KO小鼠。定量PCR分析表明，parvalbumin KO小鼠脂肪组织中的M2型巨噬细胞标志物显著增加。之后，他们通过静脉注射腺病毒将Ad-parvalbumin构建体递送到KO小鼠的肝脏，促使parvalbumin分泌到血清中。一周后，KO小鼠的M2型巨噬细胞显著减少，表明循环的parvalbumin抑制了巨噬细胞向M2型极化。

2.parvalbumin通过M2型巨噬细胞抑制产热

M2型巨噬细胞主要是通过IL4-STAT6和MCSF-mTORC2两条信号通路维持的。为此，他们在骨髓来源的巨噬细胞上研究了parvalbumin对这两条通路的影响。令人惊讶的是，parvalbumin不影响IL4诱导的STAT6磷酸化，但大大抑制了MCSF诱导的mTOCR2激活。

同时，MCSF诱导的ERK磷酸化也被parvalbumin处理所抑制，表明parvalbumin能够靶向MCSF受体（CSF1R）并影响其下游信号传导。蛋白质相互作用分析证实了parvalbumin与CSF1R之间的相互作用。后续分析表明，parvalbumin作为CSF1R的非竞争性拮抗剂发挥作用。parvalbumin阻断剂阻断了parvalbumin与CSF1R之间的相互作用，并促进巨噬细胞向M2型极化（图2）。

图2 parvalbumin阻断剂促进了M2型巨噬细胞极化[1]

（图源：Lin S, et al,. Nat Commun. 2022）

那么，parvalbumin是否通过M2型巨噬细胞来抑制产热？利用parvalbumin KO小鼠开展分析后，研究人员发现，与对照小鼠相比，KO小鼠的能量消耗显著增加，胰岛素敏感性提高，表明parvalbumin缺失可促进小鼠能量消耗，并防止其发生胰岛素抵抗。相反，在注射Ad-parvalbumin后，KO小鼠的能量消耗显著降低，产热基因表达同样降低，表明循环的parvalbumin拯救了parvalbumin缺陷表型，而且对产热调节而言是关键的。以上的结果表明，parvalbumin通过M2型巨噬细胞抑制产热基因的表达。

3.Parvalbumin阻断剂可减轻HFD诱导的肥胖

更重要的是，研究人员还发现，parvalbumin的血清浓度与小鼠和人类肥胖都呈正相关，肥胖人群的parvalbumin血清水平显著高于非肥胖人群。于是，他们推测parvalbumin阻断剂也许是一种有价值的肥胖治疗方法。他们给高脂饮食（HFD）喂养的小鼠注射parvalbumin阻断剂后，观察到小鼠体重的增加显著减少，耗氧率和能量消耗增加，且胰岛素水平显著降低，胰岛素抵抗改善（图3）。这些结果表明，parvalbumin阻断剂在治疗肥胖上有潜在价值，但还需要在人体上进一步评估。

图3 parvalbumin阻断剂减轻了HFD诱导的肥胖[1]

（图源：Lin S, et al,. Nat Commun. 2022）

文章结论与讨论，启发与展望

在这项研究中，研究人员描述了一种新的循环因子parvalbumin，它通过M2型巨噬细胞来抑制产热。作为CSF1R的非竞争性拮抗剂，parvalbumin抑制MCSF诱导的mTORC2激活和M2型巨噬细胞活化。更重要的是，阻断parvalbumin与CSF1R之间的相互作用不仅能挽救M2型巨噬细胞活化、胰岛素敏感性和产热，还改善了小鼠的肥胖。