肝母细胞瘤（hepatoblastoma）是一种罕见但严重的儿童肿瘤，它通常在幼儿期（< 3岁）出现，并且是儿童恶性肿瘤中最常见的类型之一 [1]。目前，多种治疗方法，包括手术切除、化疗、放疗以及部分患者可能需要肝移植，被用于治疗肝母细胞瘤。然而，由于肝母细胞瘤的异质性以及个体间的遗传变异，寻找更精准的治疗方法迫切需要更深入的研究。近年来，单细胞测序技术的发展为研究肿瘤的细胞异质性和发病机制提供了新的途径。通过单细胞测序，可以深入了解肝肿瘤中不同细胞类型的差异，识别潜在的靶向治疗标志物，并揭示细胞间相互作用的复杂网络 [2]。然而由于单细胞测序需要大量来源于目标组织的高活性（活率80%以上）的单细胞，并且期望获得的细胞类型尽可能贴近原有组织的丰富程度。当前的肝肿瘤解离方法获得的单细胞悬液会导致肝实质细胞缺失、整体活率低。而实际研究中肝实质细胞在肝肿瘤的演进中起举足轻重的作用，因此保持细胞比例接近真实体内环境对于研究疾病靶点和指导临床用药十分重要。该文章提出基于多步酶解和Percoll密度梯度离心分离技术的单细胞分离方案，将免疫细胞和肝实质细胞分离处理，提高了细胞的存活率和活性并通过单细胞测序进行了验证。通过这种方法，能够更精确地还原肝脏组织中不同细胞类型的比例，为单细胞测序提供了优质的样本，有望加速肝肿瘤相关研究的进展。