在样本制备的过程中,往往会应用一些试剂(如多聚甲醛、福尔马林等)对新鲜组织进行处理,这个过程可能导致抗原位点被封闭,为了避免影响后续免疫染色的效果,我们需要先对切片进行抗原修复。对于石蜡切片来说,抗原修复是不可或缺的步骤,常用的方法有酶消化法和热修复法。
1、酶消化法
作为最早的抗原修复方法,常用的消化酶有三个:胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K。但酶的作用极易受温度影响,如果消化不足,则无法充分暴露出抗原位点,过度的消化又会破坏组织结构,影响最后阳性信号的判读,因此在后续的发展中,酶消化法渐渐被热修复技术所替代,但对于个别抗原,如免疫球蛋白、补体,以及在甲醛固定、石蜡包埋的肾活检中,酶消化法依旧不可替代。
2、热修复法