第一天
一. 基因编辑工具介绍
1. 基因编辑和转基因是一样的吗?
2. 生活中的基因编辑与转基因产品
3. 基因编辑工具先驱-ZFNs和TALENs
4. 没落的ZFNs和TALENs
5. TALENs,旧工具新用,细胞器编辑利器!
6. 强势崛起的CRISPR系统
7. CRISPR系统家族介绍
8. CRISPR-Cas9的工作原理
9. CRISPR-Cas12的工作原理
10. CRISPR系统的致命缺点
11. 如何选择合适的CRISPR系统?
第二至三天
二. CRISPR系统可以做什么?
1. 基因敲除/基因敲入
i. 基因修复途径介绍(NHEJ和HDR)
ii. Knock-in和Knock-out的简介
iii. Knock-in策略简介(HDR/Retron/双pegRNA策略/GRAND/TJ-PE)
2. 多敲系统简介
3. CRISPRa/CRISPRi(基因激活与基因抑制)
i. dCas9-PVPR系统介绍
ii. dCas9-VP64/GI/SAM基因激活系统介绍
iii. 基因编辑招募系统介绍(Suntag/Moontag)
4. CRISPR系统的‘另类’应用(循环打靶)
5. CBE系统的原理及其应用
i. CBE系统进化过程总结(CBEmax/每代优化的元件及策略汇总)
ii. 基因组CBE编辑(植物育种/基因功能研究/临床治疗)
iii. 细胞器CBE编辑工具介绍(Ddda脱氨酶/MutH切口酶)
iv. CBE系统的脱靶效应
6. ABE系统的原理及其应用
i. PACE和PANCE人工定向蛋白进化系统介绍及其他常规的蛋白进化技术
ii. ABE系统的进化过程总结(ABEmax/ABE8e每代优化的元件及策略汇总)
iii. ABE系统的‘另类’应用(基因失活/跳剪/介导C编辑)
iv. 双碱基编辑系统(SWISS/STEME/A&C-BEmax/SPACE/ACBE)
7. PE系统的原理及其应用
i. PE介导精准编辑
ii. 编辑效率的影响因素(骨架二级结构/PBS长度/RTT模板)
iii. 双pegRNA的原理及其应用(基因组大片段插入)
iv. 基因组大片段删除
v. 用于AAV递送的PE系统
8. gGBE的原理及其应用
i. 糖基化酶介绍(为什么可以介导碱基编辑?)
ii. gGBE的开发与应用
iii. gGBE的后续发展预测
9. CRISPR-Case12的病毒检测应用
i. 原理介绍
ii. 应用案例介绍
第四天
三. CRISPR载体构建(实操)
1. 敲除/碱基编辑载体构建
i. 工具介绍
ii. 如何查看质粒图谱
iii. 基因靶点的选择(CRISPR-GE等线上工具展示)
iv. sgRNA的引物设计
v. 模拟构建(酶切载体/构建体系讲解)
vi. 菌落PCR
vii. 测序鉴定结果分析
2. PE系统的载体构建
i. 引物设计工具的应用
ii. 载体构建演示
iii. 测序结果分析
3. 转染阳性检测
4. 测序原理及结果查看
i. 一代测序原理
ii. Hi-TOM高通量测序
第五天
四. 基因编辑在植物种的应用
1. 基因功能研究
2. 创制新品种
五. 基因编辑在临床上的应用
1. 碱基编辑的临床应用
2. PE系统的临床应用
3. 递送系统的介绍
六. 基因编辑在微生物中的应用
1. 微生物遗传学研究
2. 生物技术(可产生生物燃料/生物塑料/药物等有用的化合物)
七. 机器学习在基因编辑领域的应用
1. 基因编辑结果的预测
2. 编辑效率影响因素的探索
3.基因编辑辅助工具的开发