AAV因其能够感染细胞而没有致病性,易于工程和生产,被广泛用作基因传递的载体。按照其组织嗜性可分为以下几种:
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AAV1载体:明显的骨骼肌嗜性(包括心肌),神经组织也可以感染;
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AAV2载体:泛嗜性,最早应用的AAV载体。有效转导肌肉,肝脏,脑组织,对于视网膜的转导效率和表达水平良好;
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AAV5载体:视网膜、神经系统、关节滑膜嗜性、肺;
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AAV8载体:明显肝嗜性,视网膜、神经组织也可以感染;
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AAV9载体:心肌嗜性,可穿过血脑屏障。
AlphaLISA®技术是均相、免洗的定量检测技术,具有灵敏高、线性范围宽、CV值小和特异性高等特点。检测细胞培养基(如DMEM)和细胞裂解物中的AAV。产品涉及AAV亚型包括:AAV1,AAV2,AAV5,AAV8和AAV9。
技术原理如下(AAV2为例):生物素化的抗AAV2抗体与链霉亲和素包被的AlphaLISA供体珠结合,抗AAV2抗体与AlphaLISA受体珠偶联。在AAV2衣壳存在下,微珠相互靠近。供体珠受到激发后,促使单线态氧分子的释放,从而触发受体珠内的能量级联能量转移,在615 nm处可检测发射光。

检测灵敏度和线性范围
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Lower Detection Limit (LDL): 4.5E+06 VP/mL
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Lower Limit of Quantification (LLOQ): 1.5E+07 VP/mL
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EC50: 2.2E+10 VP/mL
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Dynamic Range: 4.5E+06 – 1.0E+11 VP/mL
来源于优宁维药物研发官网