细胞因子经常被直接或间接地用作开发新的免疫调节疗法的药物发现靶点或重要的检测指标。包括癌症、自身免疫疾病、代谢疾病,神经退行性疾病、动脉粥样硬化,炎症等多种疾病领域。
HTRF®均相时间分辨荧光,使用两大核心技术TRF(时间分辨)和FRET(荧光共振能量转移)。标记了荧光供体Eu或Tb的抗体和标记了荧光受体的XL665或d2的抗体,结合细胞因子,使用320nm或340nm光激发供体产生荧光共振能量转移(FRET,信号620nm),受体发生665nm荧光信号。细胞因子检测模型:双抗夹心。

为什么选择HTRF®技术检测细胞因子?---小U来阐述喽!
Q1
技术成熟吗?有人在用吗?
答
问世30余年的成熟技术,被广泛应用于药物研发,细胞治疗,疫苗研究等各领域...备受国内外知名企业研究人员认可。
Q2
操作简单吗?适合新人操作吗?
答
实验室小白也能轻松独立操作!两步法检测,空板加样(16μl),再加检测试剂(4μl),孵育2h后即可读板。全程无需包被和洗涤。如此简单,YYDS!

Q3
不需要洗板,如何排除假阳性?
答
Ratio=665/620*10000,采用比值处理排除假阳性。

Q4
荧光实验,担心背景高?
答
镧系元素Eu或Tb半衰期长(ms级别),利用该特性延迟100~150μs读值,背景杂光ns淬灭,检测背景低。
Q5
试剂稳定吗?
答
特殊的“笼子结构”使得荧光供体不易被解离和破坏并且可以吸收更高能的光。(获得诺贝尔化学奖的结构哦)。7天内检测信号稳定,且支持反复读板(≥20次)。适合溯源。当然,在标准品或者样本均允许情况下,样本或标准品发生了降解等不可抗拒因素除外。
Q6
孵育后立刻读板吗?
答
完成孵育时间后可随时检测、亦可延迟读板,时间灵活掌握,不再受到时间约束,YYDS。
Q7
温度敏感吗?光敏感吗?
答
室温孵育,无需避光,又是YYDS!
Q8
灵敏度、线性范围如何?孔间差异、批间差异高吗?
答
pg级别灵敏度,检测范围4~5log。非常适合早期药筛工作。CV在5%~10%,每批试剂出厂经过严格的批间质控。
来源于优宁维药物研发官网